Metodu ta 'determinazzjoni tal-glukożju ossidużi

Il-prinċipju tal-metodu. Il-metodu huwa bbażat fuq l-ispeċifiċità ta 'l-azzjoni ta' l-enzima glukożju ossidu. Din l-enzima ossidizza l-glukosju fil-preżenza ta 'ossiġenu molekulari biex tifforma glukonolactone, li spontanjament idrolisi għall-aċidu glukoniku. Il-glukosju ossidu jossida l-glukosju biex jifforma perossidu tal-idroġenu (H₂Oh₂), li tirreaġixxi b'4-aminoantipyrine u fenol taħt l-azzjoni ta 'perossidażi. Bħala riżultat, huwa ffurmat kompost ikkulurit roża li d-densità ottika ta '510 nm hija proporzjonali għall-konċentrazzjoni ta' glukożju fil-kampjun.

glukożju + O₂ + H₂Oh → Aċidu glukoniku + H₂Oh₂

2 N₂Oh₂ + 4-aminoantipirin + fenol → quinonymine + 4H₂Oh

Tagħmir CPK, ċentrifuga, termostat, xtillieri, tubi tat-test, pipetti, materjal bijoloġiku, reaġenti li jinsabu fis-soluzzjoni tax-xogħol.

Kampjun sperimentali, ml

Kampjun standard, ml

test wieqaf (N₂O), ml

Soluzzjoni ta 'kalibrar tal-glukożju (referenza)

It-tubi huma inkubati f'temperatura ta '37 ° C għal 15-il minuta, imbagħad ikkulurizzati fuq CPC b'filtru aħdar fil-kuvetti b'saff ta' ħxuna ta '5 mm kontra kampjun vojt (N₂O). Il-kulur roża huwa stabbli għal siegħa wara l-inkubazzjoni.

Kalkolu kontenut ta 'glukosju huwa prodott bil-formula:

C =x standard C fejn

C huwa l-kontenut tal-glukosju fil-kampjun sperimentali, mol / l,

Eop - densità ottika tal-kampjun;

Jiekol - densità ottika tal-kampjun ta 'kalibrazzjoni,

Standard C - il-kontenut fis-soluzzjoni tal-kalibrazzjoni, mol / l.

Valuri normali:  trabi tat-twelid - 2.8-4.4 mmol / l

 tfal - 3.9 -5.8 mmol / l

 adulti - 3.9 - 6.2 mmol / l

Ipogliċemija (GHC).Iż-żieda fil-glukosju fid-demm hija dovuta għal ħafna raġunijiet, li skondhom żewġ gruppi ta 'ipergliċemija huma distinti.

1. Insulari - assoċjat ma 'insulina insuffiċjenti fil-ġisem jew minħabba l-ineffiċjenza ta' l-azzjoni tagħha.

2. Extrainsulari (extrainsulari) - ma jiddependux fuq l-influwenza ta 'l-insulina.

Il-proċessi li ġejjin huma l-iktar sinifikanti fil-formazzjoni ta ’HHCs: żieda fit-tqassim tal-glikoġen, żieda fin-neoglucogenesis, inibizzjoni tas-sinteżi tal-glukoġen, tnaqqis fl-użu tal-glukożju fit-tessut taħt l-influwenza ta’ antagonisti tal-insulina ormonali: somatotropin, glukokokoidi, tiroxina, tirotropina.

Ipergliċemija alimentari hija nnotata bi konsum eċċessiv ta 'glukosju fid-demm (per eżempju, ipergliċemija bit-tagħbija taz-zokkor). L-ipergliċemija “epatika” isseħħ fil-feriti mxerrda tal-fwied.

Ipergliċemija persistenti u severa ħafna drabi takkumpanja d-dijabete. Huwa normalment li jiġu iżolati d-dijabete mellitus li tiddependi mill-insulina u d-dijabete mellitus mhux dipendenti fuq l-insulina, jew, rispettivament, id-dijabete mellitus tat-tip I u d-dijabete mellitus tat-tip II. Il-formazzjoni tad-dijabete tat-tip I hija assoċjata primarjament ma 'sintesi indebolita u metaboliżmu ta' l-insulina.

It-tieni grupp ta 'ipergliċemija huwa assoċjat primarjament ma' iperfunzjoni tal-glandoli endokrinali li jipproduċu ormoni - antagonisti tal-insulina. Huwa osservat f'mard bħas-sindromu u l-marda ta 'Itsenko-Cushing, akromegalija, tijotoxikożi, fekromokitoma, glukoganoma. Il-livelli ta 'glukosju fid-demm jiżdiedu b'ċerti mard tal-fwied (b'mod partikolari, f'10-30% tal-pazjenti b'ċirrożi tal-fwied), emokromatożi (ċirrożi tal-fwied pigmentata, dijabete tal-bronż).

Ipogliċemija (GPG) - tnaqqis fil-glukosju fid-demm - ħafna drabi assoċjat ma 'żieda assoluta jew relattiva fil-livelli ta' insulina fid-demm. Ipogliċemija żejda hija osservata bħala riżultat ta ’żbilanċ bejn is-severità tal-proċessi ta’ glycogenolysis u glyconeogenesis fil-fwied fl-epatite akuta u kronika, ċirrożi, distrofija akuta u subakuta tal-fwied, intossikazzjoni bl-alkoħol, avvelenament bl-arseniku, fosfru, bi suffejra ostruttiva fit-tul, fwied konġestiv . Tnaqqis fil-konċentrazzjoni tal-glukosju fid-demm spiss jiġi osservat f'pazjenti li jbatu mill-kanċer ta 'l-esofagu u tumuri malinni oħra ta' lokalizzazzjoni barra mill-frixa (fibroma, fibrosarcoma, newroma), kif ukoll b'remetti indomabbli, anorexja, dijabete tal-fwied, uremja, treddigħ abbundanti u glukożurja f'nisa tqal.

L-ipogliċemija tista 'tkun ta' oriġini ċentrali minħabba trawma mentali, enċefalite, emorraġija subaraknoidja, tumur tal-moħħ.

1. Disturbi li jintiret bid-diġestjoni tal-karboidrati.

2. Liema tipi ta 'iperglucosemija huma magħrufa minnek?

3. X'inhuma l-kawżi ta 'iperglucosemija patoloġika?

4. X'inhi l-kawża ta 'dijabete mellitus li tiddependi mill-insulina?

5. X'inhuma l-kawżi bijokimiċi ta 'mard ereditarju: a) glikoġenosi? b) aglycogenosis? ċ) Frottosemija? d) galactosemia?

6. X'inhuma l-bidliet bijokimiċi fil-metaboliżmu tal-karboidrati waqt is-sawm?

7. Il-prinċipju tal-metodu għad-determinazzjoni tat-tolleranza tal-glukosju.

Meta huwa preskritt il-metodu tal-glucose oxidase?

Dan it-test jintuża biex jidentifika t-tolleranza taz-zokkor indebolita u l-iżvilupp ta 'prediabetes, kif ukoll fl-eqqel tal-marda. Iżda għal skopijiet bħal dawn, l-analiżi rarament tintuża, dan huwa minħabba l-ispiża għolja tagħha u l-aspettattiva twila ta 'riżultat. Ħafna drabi, id-determinazzjoni tal-glukosju fid-demm u fl-awrina billi tuża dan il-metodu tintuża fid-dijanjosi differenzjali ta 'mard bħal:

Iz-zokkor jitnaqqas istantanjament! Id-dijabete maż-żmien tista ’twassal għal mazz sħiħ ta’ mard, bħal problemi tal-vista, kundizzjonijiet tal-ġilda u tax-xagħar, ulċeri, gangrena u anke tumuri tal-kanċer! In-nies għallmu esperjenza morra biex jinnormalizzaw il-livelli taz-zokkor tagħhom. aqra

• sindromu ta 'intolleranza għall-lactose,
• intolleranza għall-fructose,
• sekrezzjoni ta 'frotttożju bil-fluwidi tal-ġisem,
• żieda fil-konċentrazzjoni ta ’pentose fl-awrina.

Il-vantaġġ bla dubju tat-test tal-glukosju ossidu huwa l-eżattezza tiegħu.

X'inhi l-bażi ta 'dan il-metodu?

Hemm diversi metodi biex tiġi ddeterminata l-konċentrazzjoni tal-glukosju fid-demm, iżda l-glukożju ossidu huwa l-iktar preċiż. Huwa bbażat fuq il-fatt li waqt l-interazzjoni taz-zokkor ma 'l-ossiġnu atmosferiku, ir-reaġent huwa ossidizzat. Il-perossidu tal-idroġenu jiġi rilaxxat fis-soluzzjoni. Din is-sustanza tinteraġixxi ma 'orthotoluidine biex tifforma kompost ikkulurit. Għall-imġieba ta 'din ir-reazzjoni, il-preżenza ta' enzimi speċjali hija meħtieġa. Waqt ir-reazzjoni ta 'ossidazzjoni, il-glukosju ossidu għandu jkun preżenti, u meta ttebba' l-likwidu, il-perossidażi trid tkun preżenti. L-intensità tal-kulur tas-soluzzjoni tiddependi mill-kontenut tal-glukosju u tkun l-iktar intensa fil-kontenut għoli tagħha.

L-essenza tad-determinazzjoni tal-glukosju ossidużi

L-evalwazzjoni tar-riżultat isseħħ bl-użu tal-metodu kwantitattiv tal-fotometrija wara l-istess perjodu ta 'żmien. Huwa obbligatorju li tuża soluzzjoni ta 'kalibrazzjoni li fiha ċertu norma ddikjarata taz-zokkor u, billi tibda minnha, tista' tiġġudika l-konċentrazzjoni ta 'glukosju fil-fluwidi tal-ġisem, ħafna drabi fid-demm.

Kif issir l-analiżi?

Materjal meħud mill-pazjent fuq stonku vojt. Għat-test, demm tal-vini jintuża f'ammont ta '5 ml. Lejlet id-dijanjosi, il-pazjent jintwera dieta stretta. Dan jagħmilha possibbli li tiġġudika l-affidabbiltà tar-riżultat u teskludi żbalji ta 'analiżi possibbli. Jumejn qabel ma tieħu d-demm, il-pazjent għandu jabbanduna d-drawwiet ħżiena tax-xorb fl-alkoħol u t-tipjip. Huwa wkoll neċessarju li tillimita l-konsum ta 'ikel ħelu żżejjed u tevita sitwazzjonijiet stressanti kull meta jkun possibbli.

Biex tikseb plażma biz-zokkor, id-demm jiġi ċċentrifikat.

Ħafna drabi, dan il-metodu għad-determinazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-glukosju jitwettaq permezz ta ’ċentrifugazzjoni, liema elementi tal-forma huma iżolati. L-ammont ta 'zokkor huwa diġà determinat fil-plażma. Meta r-reaġenti kollha meħtieġa jkunu miżjuda miegħu, il-kulur jiġi osservat wara 20 minuta jekk it-test jitwettaq fit-temperatura tal-kamra. Il-kalkolu tal-glukosju jitwettaq skont l-iskeda tal-kalibrazzjoni jew bl-użu tar-regola tal-porzjonijiet.

Reaġenti ta 'Riċerka

Biex tiddetermina z-zokkor, huwa l-iktar konvenjenti li tuża metodi espressi biex tiddetermina l-glukosju fid-demm. Dan huwa dovut għall-faċilità ta 'użu u riżultati ta' malajr. Barra minn hekk, il-pazjent m'għandux bżonn imur fil-laboratorju jew l-isptar. Iżda b'differenza mit-test tal-glukożju ossidasi, dijanjosi bħal din mhix affidabbli. Peress li ma tagħmilx differenza fil-glukosju minn zokkor ieħor u jiddetermina l-konċentrazzjoni tagħhom flimkien.

Il-bażi tar-reazzjoni tal-glukożju ossidu hija s-soluzzjoni tal-kloridu tas-sodju 9% u s-sulfat taż-żingu 50%. Huma miżjuda fl-istadju taċ-ċentrifugazzjoni tad-demm. Barra minn hekk, tintuża soluzzjoni buffer bl-aċidu aċetiku u l-aċetat tas-sodju. Il-metodu tat-titrazzjoni jiddetermina l-pH tiegħu fi 4.8. Wara dan, il-glukożju ossiduż huwa miżjud, minħabba li l-perossidu tal-idroġenu u l-perossidażi jiġu rilaxxati, li jipparteċipa fit-tebgħa tas-soluzzjoni għall-konċentrazzjoni mixtieqa biex jinkiseb riżultat preċiż.

Normi ​​fl-analiżi

Il-kejl taz-zokkor iseħħ f'unitajiet speċjali - millimoli għal kull litru ta 'soluzzjoni.

It-test tad-demm tal-Glukożju ossidu huwa obbligatorju fuq stonku vojt u uża plażma jew serum għal dan. In-norma tal-kwantità tagħha għall-adulti kemm għan-nisa kif ukoll għall-irġiel hija 3.3-5.5. Għal tfal taħt il-15-il sena, din iċ-ċifra hija kemmxejn inqas u tvarja minn 3.2-5.3. Fit-trabi tat-twelid, il-glukosju fid-demm huwa 1.7-4.2. Żieda fl-indikaturi hija osservata bl-iżvilupp ta 'pazjent bid-dijabete mellitus jew bi tolleranza tal-glukos indebolita. Din il-kundizzjoni hija prediabetes, u jekk ma tiġix trattata fil-ħin, dalwaqt twassal għall-iżvilupp ta 'din il-patoloġija severa.

Jidher impossibbli li tfejjaq id-dijabete?

Ġġudikati mill-fatt li qed taqra dawn il-linji issa, rebħa fil-ġlieda kontra z-zokkor fid-demm għadha mhix fuq in-naħa tiegħek.

U diġà ħsibt dwar trattament fl-isptar? Huwa jinftiehem, għax id-dijabete hija marda perikoluża ħafna, li, jekk ma tiġix trattata, tista 'tirriżulta fil-mewt. Għatx kostanti, awrina rapida, vista mċajpra. Dawn is-sintomi kollha huma familjari għalik.

Iżda huwa possibbli li tiġi ttrattata l-kawża aktar milli l-effett? Nirrakkomandaw li taqra artiklu dwar it-trattamenti attwali tad-dijabete. Aqra l-artiklu >>